Nghiên cứu chứng minh tác dụng estrogen của Sâm tố nữ

Tên nghiên cứu: Nghiên cứu so sánh đặc tính estrogen của 8 phytoestrogen trên dòng tế bào ung thư vú người MCF-7

Tác giả: A. Matsumara, A. Ghosh, G.S. Pope, P.D. Darbre

Nghiên cứu tại: Phòng Sinh học tế bào và phân tử, School of animal and microbial Sciences, the University of reading, P.O. Box 228, Whiteknights, Reading RG6 6AJ, UK

Đăng trên tạp chí: Journal of steroid biochemistry and molecular biology

Năm: 2005

Link: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15876408/

Nguyên liệu nghiên cứu:

• Genistein (tinh khiết 98%) – Sigma.
• Daidzein (tinh khiết 98 %), DL-equol (97-98%), (-) 8 –prenylnaringenin (98 %), coumestrol (98-99 %), trans- resveratrol (98%) – Plantech.
• Miroestrol và deoxymiroestrol được chuẩn bị và cung cấp  bới Ishikawa.
• 17β-estrogen được mua từ Steraloid.

Tất cả các hợp chất này được pha trong ethanol để tạo thành các dung dịch.

Đối tượng nghiên cứu:

Dòng tế bào ung thư vú người MCF-7.

Phương pháp nghiên cứu:

Khả năng gắn cạnh tranh với receptor estrogen (ER) trênMCF7.

Cách tiến hành:

• Tế bào MCF-7 được nuôi dưỡng trong môi trường trong cột phenol red-free RPMI (Invitrogen) với 5 % dextran- charcoal- stripped FCS (DCFCS) trong tối thiểu 3 ngày để loại bỏ các hormon steroid trong tế bào. Sau đó tế bào được thu, và đồng nhất trong 8 ống buffer (10 mM Tris-HCl, 1mM EDTA, 2mM dithiothreitol, 10 % (v/v) glycerol, 0,5 M NaCl, pH 7,4) ở 4 độ C.
• Kĩ thuật này được tiến hành đánh giá sự gắn cạnh tranh của oestradiol ở nồng độ 16 x 10-10 M và các phân tử của các hợp chất không được dán nhãn có nồng độ gấp 1-100,000 lần nồng độ estradiol.
• Kĩ thuật gắn cạnh tranh được thực hiện trong cytosol sử dụng phương pháp dextran-coated charcoal.
• Các ERs từ MCF7 được ủ ở 4 độ C trong 18 giờ cùng với oestradiol nồng độ 16 x 10 -10M và mỗi phytoestrogen với nồng độ tăng dần. Mức độ ức chế gắn ER của mỗi phytoestrogen được xác định bằng cách tăng nồng độ mỗi hợp chất này.

Kết quả:

• Việc gắn  Estrogen bị ức chế hoàn toàn bởi coumestrol (ức chế 95 %), deoxymiroestrol (ức chế 95 %)  ở tỷ lệ phân tử các chất này/ estrogen= 1000 lần.
• Miroestrol tác dụng yếu hơn deoxymiroestrol, ở tỷ lệ 1000 lần chỉ ức chế gắn estradiol 78 %.
• Sau đó đến genistein (50 %) ở tỷ lệ 1000 lần và gần như hoàn toàn (94 %) ở tỷ lệ 100,000 lần.